? ? ? 免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)是具有抗體活性的,能與相應(yīng)的抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)的球蛋白，是脊椎動物在對抗原刺激的免疫應(yīng)答中，由淋巴細胞產(chǎn)生的，普遍存在于哺乳動物的血液、組織液、淋巴液和體外分泌液中的一類蛋白質(zhì)。隨著免疫學(xué)的發(fā)展和需要，免疫球蛋白的純化和其成分的提純成為必不可少的手段。下面為大家介紹幾種免疫球蛋白純化的常用方法。

一、鹽析法

? ? ? 鹽析作為一種重要的沉淀手段，在實驗室中常被用來分離純化蛋白質(zhì)，特別是對原料的初步分離。蛋白質(zhì)在水中的溶解度取決于蛋白質(zhì)分子的水合程度，利用添加無機鹽的辦法改變蛋白質(zhì)的水合程度，可造成蛋白質(zhì)的沉淀。由于各種蛋白質(zhì)表面極性基團的數(shù)目和分布不同，隨著無機鹽加入量的增加，不同蛋白質(zhì)在析出順序上具有先后差異，因此通過控制無機鹽的加入量，以分級沉淀的方式，實現(xiàn)蛋白質(zhì)的分離純化。

二、離子交換層析法

? ? ? 離子交換是指液相中的離子與固定相上可解離基團的可逆交換反應(yīng)。利用這個反應(yīng)先將要分離的混合物在一定 pH 的溶液中解離，而后流經(jīng)固定相，使之與固定相上的可解離基團進行離子交換，吸附于固定相上，凡不能進行交換吸附的成分，則流出層析柱外。再根據(jù)交換吸附于固定相上的各組分解離度的差別，運用不同的 pH值或不同鹽濃度的溶液作流動相，流過層析柱將各組分分別再交換洗脫下來，這樣混合物的各組分即被分開，達到分離的目的，此即為離子交換層析。

三、凝膠過濾法

? ? ? ?凝膠顆粒是網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，當(dāng)分子大小不同的混合物通過凝膠柱時，分子大的先下來，分子小的嵌入凝膠顆粒的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中后下來，從而將分子大小不同的物質(zhì)分離開來，即為分子篩的作用。常用凝膠：葡聚糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂糖凝膠，分離Ig多用G150。

四、親和層析法

? ? ? ?利用抗原抗體的結(jié)合具有特異性、可逆性，將純化抗原先交聯(lián)到載體（瓊脂糖珠）上，制成親和層析柱，當(dāng)Ab（Ig）通過時，與抗原特異性結(jié)合在柱上，Ab中雜質(zhì)流出。然后通過改變緩沖液 pH、離子強度，使Ab解脫下來。

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